四、 分泌液的采集

（一）陰道分泌物的采集

適于觀察陰道角質(zhì)化上皮細(xì)胞。

1、 滴管沖洗法

用消毒滴管吸取少量生理鹽水仔細(xì)、反復(fù)沖洗被檢雌性動物陰道，將沖洗液吸出滴在載波片上晾干后染色鏡檢。也可直接將沖洗液置于低倍顯微鏡下觀察，根據(jù)細(xì)胞類型變化鑒別實驗動物動情周期中的不同時期。

2、棉拭子法

用消毒棉拭子旋轉(zhuǎn)插入動物陰道內(nèi)，然后在陰道內(nèi)輕輕轉(zhuǎn)動幾下后取出，即可進(jìn)行涂片鏡檢。有的動物如大、小鼠等，陰道液較少，取其陰道液時，可用先浸濕后又?jǐn)D盡無菌生理鹽水的棉拭子取陰道液，這種棉拭子比干棉拭子容易插入陰道。對體型較大的實驗動物，也可先按摩或刺激其陰部，而后再采集其陰道液。

3、刮取法

用光滑的玻璃小勺或牛角制的小刮片慢慢插入陰道內(nèi)，在陰道壁輕輕刮取一點陰道內(nèi)含物，進(jìn)行涂片鏡檢。

（二）精液（semen）的采集

1、人工陰道套采精液法

本法適用于犬、豬、羊等大動物，采用特制的人工陰道套套在實驗動物陰莖上采集精液。采精時，一手捏住陰道套，套住雄性動物的陰莖，以*套住雄性動物的陰莖為佳，插入陰道套后，若實驗動物發(fā)出低叫聲，表明已經(jīng)射精。此時可取下陰道套，拆下采精瓶，取出精液，迅速做有關(guān)檢查。

2、陰道栓采精法

本法是將陰道栓涂片染色，鏡檢凝固的精液。陰道栓是雄性大、小鼠的精液和雌性陰道分泌物混合，在雌鼠陰道內(nèi)凝結(jié)而成白色稍透明、圓錐形的栓狀物，一般交配后2～4小時即可在雌鼠陰道口形成，并可在陰道停留12～24小時。

3、其他采精液法

將發(fā)情的雌性動物放在雄性動物一起，當(dāng)雄性動物被刺激發(fā)情后，立即將雄性動物分開，再用人工法刺激其射精。也可按摩雄性動物的生殖器或用電流等物理方法刺激雄性動物的陰莖或其他性敏感區(qū)，使雄性動物被刺激發(fā)情，直至射精，用采精瓶采集射出的精液。

（三）乳汁的采集

用按摩擠奶收集乳汁的方法適合犬、豬、羊等大動物乳汁的采集。選用哺乳期的實驗動物，在早上采集乳汁量zui多，用手指輕輕按摩實驗動物乳頭，使乳汁自然流出，如乳汁不能自然流出，可張開手掌從乳房基底部朝乳頭方向按摩、擠壓整個乳房，即可擠出乳汁。

五、消化液的采集

（一） 唾液

1、直接抽取法

在急性實驗中，可用吸管直接插入動物口腔或唾液腺導(dǎo)管抽吸唾液，此法非常簡單，但從口腔抽吸唾液會有雜質(zhì)混入。

2、制造腮腺瘺法

在慢性實驗中，收集狗的唾液，要用外科手術(shù)方法將腮腺導(dǎo)管開口移向體外，即以腮腺導(dǎo)管為中心，切成一直徑約2～3cm的圓形粘膜片，將此粘膜片，與周圍組織分開，穿過皮膚切口引到頰外，將帶有導(dǎo)管開口的粘膜片與周圍的皮膚縫合，腮腺分泌的唾液就流出頰外。這種方法可以收集到較純凈的唾液。

（二）胃液

1、直接收集胃液法

急性實驗時，先將動物麻醉，將插胃管經(jīng)口插入胃內(nèi)，在灌胃管的出口連一注射器，用此注射器可收集到胃液，此法適用于狗等大型動物。如是大鼠，需手術(shù)剖腹，從幽門端向胃內(nèi)插入一塑料管，再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理鹽水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，進(jìn)行分析。

2、制備胃瘺法

在慢性實驗中，收集胃液多用胃瘺法，如全胃瘺法、巴氏小胃瘺法、海氏小胃瘺法等。制備小胃是將動物的胃分離出一小部分，縫合起來形成小胃，主胃與小胃互不相通，主胃進(jìn)行正常消化，從小胃可收集到純凈的胃液。應(yīng)用該法，可以待動物恢復(fù)健康后，在動物清醒狀態(tài)下反復(fù)采集胃液。

（三）胰液和膽汁

在動物實驗中，主要是通過對胰總管和膽總管的插管而獲得胰液或膽汁。狗的胰總管開口于十二指腸降部，在緊靠腸壁處切開胰管，結(jié)扎固定并與導(dǎo)管相連，即可見無色的胰液流入導(dǎo)管。大鼠的胰管與膽管匯集于一個總管，在其入腸處插管固定，并在近肝門處結(jié)扎和另行插管，可分別收集到胰液和膽汁。有時也可通過制備胰瘺和膽囊瘺來獲得胰液和膽汁。

六、腦脊液的采集

（一）狗、兔腦脊液的采集通常采取脊髓穿刺法

穿刺部位在兩髂連線中點稍下方第七腰椎間隙。動物輕度麻醉后，側(cè)臥位固定，使頭部及尾部向腰部盡量彎曲，剪去第七腰椎周圍的被毛。消毒后操作者在動物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮膚，右手持腰穿刺針垂直刺入，當(dāng)有落空感及動物的后肢跳動時，表明針已達(dá)椎管內(nèi)（蛛網(wǎng)膜下腔），抽去針芯，即見腦脊液流出。如果無腦脊液流出，可能是沒有刺破蛛網(wǎng)膜。輕輕調(diào)節(jié)進(jìn)針方向及角度，如果腦脊液流的太快，插入針芯稍加阻塞，以免導(dǎo)致顱內(nèi)壓突然下降而形成腦疝。

（二）大鼠腦脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法

在大鼠麻醉后，頭部固定于定向儀上。頭頸部剪毛、消毒，用手術(shù)刀沿縱軸切一縱行切口（約2cm）用剪刀鈍性分離頸部背側(cè)肌肉。為避免出血，zui深層附著在骨上的肌肉用手術(shù)刀背刮開，暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔進(jìn)針直接抽取腦脊液。抽取完畢逢好外層肌肉、皮膚。刀口處可撒些磺胺藥粉，防止感染。采完腦脊液后，應(yīng)注入等量的消毒生理鹽水，以保持原來腦脊髓腔的壓力。

七、骨髓的采集

1、大鼠、小鼠骨髓的采集

用頸椎脫臼法處死動物，剝離出胸骨或股骨，用注射器吸取少量的Hank平衡鹽溶液，沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液。如果是取少量的骨髓作檢查，可將胸骨或股骨剪斷，將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的玻片上，混勻后涂片涼干即可染色檢查。

2、大動物骨髓的采集

狗等大動物骨髓的采集可采取活體穿刺方法。先將動物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮膚，然后估計好皮膚到骨髓的距離，把骨髓穿刺針的長度固定好。操作人員用左手把穿刺點周圍的皮膚繃緊，右手將穿刺針在穿刺點垂直刺入，穿入固定后，輕輕左右旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入，當(dāng)穿刺針進(jìn)入骨髓腔時常有落空感。狗骨髓的采集，一般采用髂骨穿刺。狗等大動物常用的骨髓穿刺點：胸骨：穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處。肋骨：穿刺部位是第5～7肋骨各點的中點。脛骨：穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨，穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔，防止發(fā)生氣胸。